公共场所毛巾、床上卧具大肠菌群检测实施细则
一、范围
适用于公共场所内公用茶具大肠菌群的测定。
二、引用标准
三、定义
大肠菌群 指一群在37℃、24h培养能发酵乳糖、产酸、产气、需氧和兼性厌氧的革兰氏阴性无芽胞杆菌。
四、仪器
1.高压蒸汽灭菌器。
2.干热灭菌箱。
3.培养箱:36℃±1℃。
4.冰箱。
5.电炉。
6.天平。
7.灭菌平皿:直径9cm。
8.灭菌刻度吸管:1ml,10ml。
9.灭菌棉拭子。
10.灭菌剪刀。
11.pH计或精密pH试纸。
五、培养基和试剂
1.乳糖胆盐发酵培养液
1.1成分: 蛋白胨 20g
猪胆盐(或牛、羊胆盐) 5g
乳糖 10g
0.04%溴甲酚紫水溶液 25ml
蒸馏水 1000ml
1.2制法:将蛋白胨、胆盐及乳糖溶于蒸馏水中,调pH至7.4,加0.04%溴甲酚紫水溶液,混匀,分装到带有倒管的试管中,每管10ml。115℃15min高压灭菌。
2.伊红美蓝琼脂
2.1成分:蛋白胨 10g
乳糖 10g
磷酸氢二钾 2g
琼脂 17g
2%伊红水溶液 20ml
0.65%美蓝溶液 10ml
蒸馏水 1000ml
2.2制法:将蛋白胨、磷酸盐和琼脂溶解于蒸馏水中,调pH至7.1,分装到烧瓶内。121℃15min高压灭菌,临用时加入乳糖并加热溶化琼脂,冷至50~55℃加入伊红和美蓝溶液,摇匀,倾注平板…………
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